四個細(xì)胞計(jì)數(shù)室的網(wǎng)格圖示（A,B,C,D）

 

 

*一次性塑料計(jì)數(shù)板，具有兩個細(xì)胞入口， 細(xì)胞計(jì)數(shù)網(wǎng)格鑲嵌在細(xì)胞計(jì)數(shù)板的主體上.

*計(jì)數(shù)網(wǎng)格四個角的方格作為細(xì)胞計(jì)數(shù)室， A （左上）, B （右上）, C （右下）, and D （左下）.

*每個細(xì)胞計(jì)數(shù)室長度為1.00mm （粗網(wǎng)格線中心和細(xì)網(wǎng)格線中心之間的距離）,載片與蓋片之間的縫隙高度是0.10mm. 因此每個細(xì)胞計(jì)數(shù)室的體積是1mm *1mm *0.1mm =10-4 ml.

 

 

 

使用說明

（1） 充分混勻細(xì)胞，將細(xì)胞懸液滴加在兩個細(xì)胞入口處。

（2） 放在顯微鏡下靜置1-2分鐘等待細(xì)胞附著在計(jì)數(shù)板上。

 

（3） 按照A → B → C → D 的順序?qū)γ總€細(xì)胞計(jì)數(shù)室的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)后加和。

（關(guān)于網(wǎng)格線上的計(jì)數(shù)規(guī)則清參照下圖以及注釋（2））

（3） 細(xì)胞密度（Cell Density）通過以下公式計(jì)算得到，N是四個細(xì)胞計(jì)數(shù)室的

（4） 細(xì)胞總數(shù).

 

Cell Density ＝ （N/４） x 104 cells/ｍL

（＊）對于計(jì)數(shù)前經(jīng)過稀釋的細(xì)胞懸液，要將上式計(jì)算所得的細(xì)胞密度乘以稀釋倍數(shù)。.

 

注意

○ count ● not count

 

（1） 為了將誤差最小化，四個計(jì)數(shù)室中的細(xì)胞均應(yīng)被計(jì)數(shù). 只計(jì)數(shù)一個細(xì)胞室會增加誤差的機(jī)會，.

 

要取得更加正確的數(shù)值可以將細(xì)胞加在兩個細(xì)胞入口，并取兩個N值的平均值。

（2） （邊界線細(xì)胞計(jì)數(shù)規(guī)則）

細(xì)胞計(jì)數(shù)室上的方格邊線上，細(xì)網(wǎng)格線上的細(xì)胞應(yīng)該計(jì)數(shù)，粗網(wǎng)格線上的細(xì)胞則不要計(jì)入，例如細(xì)胞計(jì)數(shù)室A（見右圖）

（3） 為了提高計(jì)算細(xì)胞存活率，操作者應(yīng)該在染色后20分鐘內(nèi)完成計(jì)數(shù)（對于對染色液敏感的細(xì)胞應(yīng)在5分鐘內(nèi)完成）。細(xì)胞在染色液中時間過長會增加死細(xì)胞的數(shù)量。.

（4） 氣泡在細(xì)胞計(jì)數(shù)室中偶爾會出現(xiàn)，如果加樣后細(xì)胞在計(jì)數(shù)室中停留時間過長，就有可能出現(xiàn)氣泡干擾計(jì)數(shù)結(jié)果。

（5） 細(xì)胞計(jì)數(shù)室具有經(jīng)過預(yù)處理的表面，操作者不能重復(fù)使用計(jì)數(shù)板，因?yàn)樵谝淮问褂煤笥?jì)數(shù)室表面特性改變，重復(fù)用后會帶來不正確的計(jì)數(shù)結(jié)果。

（6） 為了儲存沒有用過的計(jì)數(shù)板，.操作者應(yīng)將其放入密封的保險(xiǎn)袋中，不要將用過的塑料板裝進(jìn)原來的塑料袋中。

（7） 在室溫下保存，高溫會改變計(jì)數(shù)室表面的特性。

（8） 實(shí)驗(yàn)室專用，非臨床，治療，診斷用途。