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Proteomix 離子交換色譜柱 Sepax

Proteomix 離子交換色譜柱

  • 產(chǎn)品綜述
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 Proteomix離子交換相的化學(xué)結(jié)構(gòu)示意圖

Proteomix離子交換樹脂由剛性PS/DVB內(nèi)核,完全覆蓋PS/DVB內(nèi)核的納米厚度的親水涂層,以及一層均勻的離子交換官能團(tuán)構(gòu)成

 

    Proteomix離子交換樹脂采用了賽分公司獨(dú)創(chuàng)的合成技術(shù),所得到的無孔樹脂具有高的離子交換容量。填料為剛性、球形、高交聯(lián)度的聚苯乙烯/二乙烯苯(PS/DVB)顆粒。無孔填料的粒徑有1、1.8、3、5和10 μm等幾種規(guī)格。PS/DVB樹脂表面鍵合有一層高度親水的納米厚度的中性聚合物薄膜。疏水的PS/DVB樹脂表面完全被這種親水材料覆蓋,從而消除了PS/DVB對(duì)生物分子的不可逆吸附,保證了其具有很高的分離效率和生物樣品回收率。運(yùn)用賽分獨(dú)有的化學(xué)鍵合技術(shù),可將離子交換官能基團(tuán)致密均勻地鍵合在親水層的表面,獲得高容量的離子交換層。無孔Proteomix離子交換樹脂的獨(dú)特之處在于它綜合了高容量和無孔樹脂所固有的高分離效率兩個(gè)優(yōu)點(diǎn)。Proteomix離子交換樹脂可用于蛋白、寡核苷酸、多肽、聚多糖、細(xì)胞溶解液、納米顆粒和納米管等的分離。

 

 pro1-2.jpg

Proteomix SCX、WCX、SAX和WAX填料的化學(xué)組成

    離子交換固定相有強(qiáng)陽離子交換(SCX)、弱陽離子交換(WCX)、強(qiáng)陰離子交換(SAX)、弱陰離子交換(WAX)四種。Proteomix SCX、WCX、SAX、WAX相分別是將磺酸基、羧基、季銨基和叔胺基化學(xué)鍵合在無孔PS/DVB樹脂親水涂層表面而形成的。

 pro1-3.jpg

Proteomix樹脂登上Labplus International期刊(2006, September, Vol. 20)的封面

 

Proteomix色譜柱技術(shù)參數(shù)表

固定相

孔徑

粒徑 (µm)

動(dòng)態(tài)載量

適用pH范圍

Proteomix SCX-NP1.7, NP3, NP5 & NP10

Non-porous

1.7, 3, 5, 10

~60, 54, 38, and 20 mg/mL

2-12

Proteomix WCX-NP1.7, NP3, NP5 & NP10

Non-porous

1.7, 3, 5, 10

~25, 19, 15 and 10 mg/mL

2-12

Proteomix SAX-NP1.7, NP3, NP5 & NP10

Non-porous

1.7, 3, 5, 10

~43, 35, 28, and 17 mg/mL

2-12

Proteomix WAX-NP1.7, NP3, NP5 & NP10

Non-porous

1.7, 3, 5, 10

~35, 26, 18, and 12 mg/mL

2-12

● 單分散型填料顆粒

● 寬的pH范圍: 2-12

● 優(yōu)異的分離效率、選擇性和分離能力

● 耐受高壓:10、5、 3 &1.7 μm分別可以耐受4000, 6000, 8000 & 12000 psi

● 對(duì)不同生物物種的差異性分析具有高的分辨率

● 1.7 & 3 μm粒徑的填料最適合用于蛋白質(zhì)組學(xué)中的全蛋白分離和分析

● 適合多肽、碳水化合物、多糖、蛋白質(zhì)、多聚核苷酸、細(xì)胞裂解液和多維色譜分離

 

高的吸附容量

 

    眾所周知,無孔樹脂具有最大傳質(zhì)和最小橫向擴(kuò)散的優(yōu)點(diǎn),因此可使樣品得到快速、高效的分離。但是,由于無孔樹脂的比表面積低,這就導(dǎo)致了它的分離容量不高,從而限制了其在實(shí)踐中的許多應(yīng)用。賽分科技所開發(fā)的合成技術(shù)使Proteomix離子交換樹脂在提高無孔樹脂交換容量方面取得了創(chuàng)新性突破。該技術(shù)可以使無孔樹脂的吸附容量達(dá)到與有孔樹脂相當(dāng)?shù)乃?。從圖1中可以看到,3 µm粒徑的Proteomix SAX和WAX無孔離子交換樹脂的動(dòng)態(tài)吸附載量分別為35和26 mg/mL。圖2顯示3 µm粒徑的Proteomix SCX無孔樹脂的動(dòng)態(tài)吸附載量可高達(dá)53.5 mg/mL。

 

圖1. Proteomix陰離子交換樹脂(3 µm)動(dòng)態(tài)吸附載量測(cè)試 

 

17.jpg

流動(dòng)相:    10 mM Tris/HCl, pH 8.0; 
流速:      0.25 mL/min
檢測(cè)波長(zhǎng):  280 nm
樣品:      3 mg/mL BSA

 

 

圖2. Proteomix陽離子交換樹脂(3 µm) 動(dòng)態(tài)吸附載量測(cè)試

 

流動(dòng)相:     10 mM Tris/HCl, pH 8.0
流速:       0.25 mL/min
檢測(cè)波長(zhǎng):   280 nm
樣品:       3 mg/mL溶菌酶

 

19.jpg

 

圖3. 細(xì)胞色素C(20 mg/mL)的吸附容量測(cè)試圖譜

20.jpg


 

流動(dòng)相:    A, 20 mM PBS; B, A+1.0 M NaCl
梯度:      0-70% B (21 min)
流速:      0.35 mL/min
壓力:      2,800 psi
檢測(cè)波長(zhǎng):  280 nm

 

 

    這種高吸附容量的離子交換樹脂可在高樣品負(fù)載量的情況下依然還具有高分離效率和高分辨率的特點(diǎn)。從圖6中可以看到,采用1.8µm粒徑的Proteomix SCX 無孔樹脂,當(dāng)樣品負(fù)載量高達(dá)200µg時(shí)色譜柱對(duì)細(xì)胞色素C仍具有滿意的分離效果。

                                                         

高的分辨率和高選擇性

 

    Proteomix無孔樹脂具有三個(gè)特點(diǎn)。首先,納米厚度的親水層完全消除了PS/DVB與生物樣品之間的非特異性相互作用。其次,無孔顆粒結(jié)構(gòu)使樣品的橫向擴(kuò)散達(dá)到最小并阻止了其向填料顆粒內(nèi)部的擴(kuò)散。第三,賽分公司的專有技術(shù)可以合成均勻致密的離子交換層。經(jīng)過獨(dú)具匠心設(shè)計(jì)的Proteomix SCX-NP、WCX-NP、SAX-NP和WAX-NP樹脂可為蛋白質(zhì)、寡核苷酸、糖類和多肽等提供最好的分辨率和分離效率。圖7是4.6mm I.D.?50mm Proteomix SCX-NP3 (3µm)短柱對(duì)三種蛋白混合物(核糖核酸酶A、細(xì)胞色素C和溶菌酶)的分離圖譜。溶菌酶在5cm長(zhǎng)的柱子上分離效率達(dá)到了100,000理論塔板數(shù),這樣的分離效果是前所未有的。

 

圖4. Proteomix SCX-NP 柱對(duì)蛋白混合物的分離

 pro24.jpg

圖5. Proteomix SCX-NP 柱(4.6 mm I.D.´50 mm, 3 µm)分離溶菌酶及其雜質(zhì),分離條件同圖4。

 

 

 pro25.jpg

 

    獨(dú)特的Proteomix離子交換色譜柱對(duì)蛋白分離具有最高的選擇性。如上圖所示,溶菌酶的6個(gè)色譜峰在4.6 mm I.D.´50 mm Proteomix SCX-NP3 (3 µm)短柱上得到了很好的分離。如此高的選擇性遠(yuǎn)優(yōu)于其他公司同類產(chǎn)品。

 

 

圖6. 用Proteomix SAX-NP5柱分離卵清蛋白和BSA混合物

20.jpg


 

    左圖是5 µm粒徑的Proteomix SAX-NP柱對(duì)卵清蛋白和BSA混合物的分離結(jié)果。從圖中可以明顯看到卵清蛋白及其雜質(zhì)和BSA及其二聚體的分離。

 

 
粒徑對(duì)分離效果的影響

 

    填料粒徑越小,分離效率越高,分離速度越快。 Proteomix離子交換樹脂的粒徑具有多種規(guī)格,粒徑從1.0 µm到10 µm不等,可用于分析和半制備等不同用途。用1.7、3、5和10 µm四不同粒徑的弱陽離子交換樹脂對(duì)三種蛋白分離得到的譜圖如圖7。從圖中可以看到,粒徑越小,分離效率和分辨率就越高。例如溶菌酶中一個(gè)標(biāo)號(hào)為N的雜質(zhì),在用10 µm粒徑的WCX柱基本不能得到分離。在用5 µm粒徑的WCX柱上則基本達(dá)到基線分離。當(dāng)粒徑減小到3 µm時(shí),可以獲得基線分離。而當(dāng)粒徑進(jìn)一步降低到1.7 µm時(shí)雜質(zhì)可得到完全分離。

 

圖7. 不同粒徑Proteomix WCX-NP 柱分離蛋白混合物

20.jpg

流動(dòng)相:      A, 20 mM PBS; B, A+1.0 M NaCl
梯度:        0-100% B (20 min)
流速:        1.0 mL/min(WCX-NP1.7為0.75 mL/min)
樣品:        蛋白濃度(1.0 mg/mL)
(1) 核糖核酸酶A
(2) 細(xì)胞色素C
(3) 溶菌酶
檢測(cè)波長(zhǎng):    UV 280 nm.

 

 


高的批間重現(xiàn)性

 

    賽分科技的Proteomix離子交換柱具有極高的批間重現(xiàn)性,這得益于受到嚴(yán)格監(jiān)控的聚合物樹脂生產(chǎn)及表面化學(xué)修飾工藝。不同批次間的保留時(shí)間誤差在6%以內(nèi)。圖8是對(duì)三批3 µm粒徑的Proteomix SAX-NP柱分析結(jié)果的比較。

 

圖8. Proteomix SAX 柱的批間重現(xiàn)性

 

20.jpg

測(cè)試條件: SAX-NP3 柱(3 µm, 4.6 mm I.D.×50 mm); 20 mM Tris, pH 8.0, 0-0.3 M NaCl (15 min); 流速: 0.5 mL/min; 檢測(cè)波長(zhǎng): 214 nm.

 

Proteomix SCX-NP

 

產(chǎn)品名稱

粒度

孔徑

規(guī)格

訂貨號(hào)

Proteomix SCX-NP

3 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

401NP3-4001

Proteomix SCX-NP

3 μm

NP

4.6x50mm

401NP3-4605

Proteomix SCX-NP

3 μm

NP

4.6x100mm

401NP3-4610

Proteomix SCX-NP

3 μm

NP

4.6x150mm

401NP3-4615

Proteomix SCX-NP

5 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

401NP5-4001

Proteomix SCX-NP

5 μm

NP

4.6x50mm

401NP5-4605

Proteomix SCX-NP

5 μm

NP

4.6x100mm

401NP5-4610

Proteomix SCX-NP

5 μm

NP

4.6x150mm

401NP5-4615

Proteomix SCX-NP

5 μm

NP

4.6x250mm

401NP5-4625

Proteomix SCX-NP

5 μm

NP

7.8x100mm

401NP5-7810

Proteomix SCX-NP

5 μm

NP

7.8x250mm

401NP5-7825

Proteomix SCX-NP

5 μm

NP

10.0x250mm

401NP5-10025

Proteomix SCX-NP

10 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

401NP10-4001

Proteomix SCX-NP

10 μm

NP

4.6x50mm

401NP10-4605

Proteomix SCX-NP

10 μm

NP

4.6x100mm

401NP10-4610

Proteomix SCX-NP

10 μm

NP

4.6x150mm

401NP10-4615

Proteomix SCX-NP

10 μm

NP

4.6x250mm

401NP10-4625

Proteomix SCX-NP

10 μm

NP

7.8x150mm

401NP10-7815

Proteomix SCX-NP

10 μm

NP

7.8x250mm

401NP10-7825

 

 

Proteomix WCX-NP

 

產(chǎn)品名稱

粒度

孔徑

規(guī)格

訂貨號(hào)

Proteomix WCX-NP

3 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

402NP3-4001

Proteomix WCX-NP

3 μm

NP

4.6x50mm

402NP3-4605

Proteomix WCX-NP

3 μm

NP

4.6x100mm

402NP3-4610

Proteomix WCX-NP

3 μm

NP

4.6x150mm

402NP3-4615

Proteomix WCX-NP

5 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

402NP5-4001

Proteomix WCX-NP

5 μm

NP

4.6x50mm

402NP5-4605

Proteomix WCX-NP

5 μm

NP

4.6x100mm

402NP5-4610

Proteomix WCX-NP

5 μm

NP

4.6x150mm

402NP5-4615

Proteomix WCX-NP

5 μm

NP

4.6x250mm

402NP5-4625

Proteomix WCX-NP

5 μm

NP

7.8x100mm

402NP5-7810

Proteomix WCX-NP

5 μm

NP

7.8x250mm

402NP5-7825

Proteomix WCX-NP

5 μm

NP

10.0x250mm

402NP5-10025

Proteomix WCX-NP

10 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

402NP10-4001

Proteomix WCX-NP

10 μm

NP

4.6x50mm

402NP10-4605

Proteomix WCX-NP

10 μm

NP

4.6x100mm

402NP10-4610

Proteomix WCX-NP

10 μm

NP

4.6x150mm

402NP10-4615

Proteomix WCX-NP

10 μm

NP

4.6x250mm

402NP10-4625

Proteomix WCX-NP

10 μm

NP

7.8x150mm

402NP10-7815

Proteomix WCX-NP

10 μm

NP

7.8x250mm

402NP10-7825

 

 

Proteomix SAX-NP

 

產(chǎn)品名稱

粒度

孔徑

規(guī)格

訂貨號(hào)

Proteomix SAX-NP

3 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

403NP3-4001

Proteomix SAX-NP

3 μm

NP

4.6x50mm

403NP3-4605

Proteomix SAX-NP

3 μm

NP

4.6x100mm

403NP3-4610

Proteomix SAX-NP

3 μm

NP

4.6x150mm

403NP3-4615

Proteomix SAX-NP

5 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

403NP5-4001

Proteomix SAX-NP

5 μm

NP

4.6x50mm

403NP5-4605

Proteomix SAX-NP

5 μm

NP

4.6x100mm

403NP5-4610

Proteomix SAX-NP

5 μm

NP

4.6x150mm

403NP5-4615

Proteomix SAX-NP

5 μm

NP

4.6x250mm

403NP5-4625

Proteomix SAX-NP

5 μm

NP

7.8x100mm

403NP5-7810

Proteomix SAX-NP

5 μm

NP

7.8x250mm

403NP5-7825

Proteomix SAX-NP

5 μm

NP

10.0x250mm

403NP5-10025

Proteomix SAX-NP

10 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

403NP10-4001

Proteomix SAX-NP

10 μm

NP

4.6x50mm

403NP10-4605

Proteomix SAX-NP

10 μm

NP

4.6x100mm

403NP10-4610

Proteomix SAX-NP

10 μm

NP

4.6x150mm

403NP10-4615

Proteomix SAX-NP

10 μm

NP

4.6x250mm

403NP10-4625

Proteomix SAX-NP

10 μm

NP

7.8x150mm

403NP10-7815

Proteomix SAX-NP

10 μm

NP

7.8x250mm

403NP10-7825

 

 

Proteomix WAX-NP

 

產(chǎn)品名稱

粒度

孔徑

規(guī)格

訂貨號(hào)

Proteomix WAX-NP

3 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

404NP3-4001

Proteomix WAX-NP

3 μm

NP

4.6x50mm

404NP3-4605

Proteomix WAX-NP

3 μm

NP

4.6x100mm

404NP3-4610

Proteomix WAX-NP

3 μm

NP

4.6x150mm

404NP3-4615

Proteomix WAX-NP

5 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

404NP5-4001

Proteomix WAX-NP

5 μm

NP

4.6x50mm

404NP5-4605

Proteomix WAX-NP

5 μm

NP

4.6x100mm

404NP5-4610

Proteomix WAX-NP

5 μm

NP

4.6x150mm

404NP5-4615

Proteomix WAX-NP

5 μm

NP

4.6x250mm

404NP5-4625

Proteomix WAX-NP

5 μm

NP

7.8x100mm

404NP5-7810

Proteomix WAX-NP

5 μm

NP

7.8x250mm

404NP5-7825

Proteomix WAX-NP

5 μm

NP

10.0x250mm

404NP5-10025

Proteomix WAX-NP

10 μm

NP

4.0x10mm(保護(hù)柱)

404NP10-4001

Proteomix WAX-NP

10 μm

NP

4.6x50mm

404NP10-4605

Proteomix WAX-NP

10 μm

NP

4.6x100mm

404NP10-4610

Proteomix WAX-NP

10 μm

NP

4.6x150mm

404NP10-4615

Proteomix WAX-NP

10 μm

NP

4.6x250mm

404NP10-4625

Proteomix WAX-NP

10 μm

NP

7.8x150mm

404NP10-7815

Proteomix WAX-NP

10 μm

NP

7.8x250mm

404NP10-7825

 

 

注:以上為常備規(guī)格訂貨信息,其它規(guī)格或特殊定制產(chǎn)品,電詢。

 

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